Viêm gan C là một bệnh nhiễm trùng gan do virus Flaviviridae HCV gây ra, bao gồm một hoặc nhiều phân tử RNA. Theo quy định, một loạt các biện pháp chẩn đoán được thực hiện để xác định bệnh viêm gan C. PCR là một phân tích xác nhận chính xác chẩn đoán. Thường thì các bác sĩ đưa ra kết luận khi bệnh nhân đã có những dấu hiệu đầu tiên của bệnh.
Viêm gan C là gì
Tổn thương gan do nhiễm vi rút lây truyền qua đường máu hoặc quan hệ tình dục được gọi là viêm gan C. Tác nhân gây bệnh là một loại vi rút có chứa RNA thuộc các tác nhân lây nhiễm không tế bào thuộc họ Flaviviridae. Nhiễm trùng có thể ở trong cơ thể một thời gian dài mà không biểu hiện ra ngoài. Do đó, chỉ khi vi sinh vật được phát hiện bằng xét nghiệm máu sử dụng PCR RNA RNA, thì bệnh viêm gan C (như một chẩn đoán) mới được coi là chính đáng.
Flavivirus không được tạo ra trong các tế bào cô lập được nuôi cấy nhân tạo. Trong quá trình sinh sản, tác nhân lây nhiễm tạo ra các biến đổi khác biệt về mặt miễn dịch. Những yếu tố này khiến cơ thể không chophản ứng bảo vệ thích hợp và các chuyên gia đang gặp khó khăn trong việc phát triển một loại vắc xin hiệu quả.
Vi-rút lây truyền qua đường miệng. Đối với nhiễm trùng, nó phải nhập đủ số lượng trực tiếp vào máu.
Những xét nghiệm nào được thực hiện cho bệnh viêm gan C
Các bệnh lý do virus của gan được chẩn đoán bằng các xét nghiệm trong phòng thí nghiệm. Các nghiên cứu lâm sàng về bệnh viêm gan C được thực hiện bằng cách nghiên cứu các kháng nguyên lạ và nguy hiểm hoặc các hợp chất protein (kháng thể) trong vật liệu sinh học của bệnh nhân, chủ yếu là trong máu.
- Xét nghiệm miễn dịch men (ELISA). Phương pháp dựa trên việc phát hiện kháng thể lgM trong máu. Immunoglobulin được coi là lớn nhất và là một pentamer. Nó thể hiện trong phản ứng bảo vệ chính của tế bào lympho với một chất lạ không xác định.
- Xét nghiệm phóng xạ (RIA) - xác định định lượng globulin miễn dịch lgM bằng cách sử dụng đồng vị phóng xạ được dán nhãn của i-ốt.
- PCR của bệnh viêm gan C - xác định RNA của virus trong vật liệu sinh học (máu). Phân tích này xác nhận chẩn đoán một cách đáng tin cậy.
Thử nghiệm IgG không đáng tin cậy. Sự hiện diện của nó trong huyết thanh không chỉ có thể cho thấy sự hiện diện của virus flavivirus mà còn cho thấy một bệnh nhiễm trùng khác trong quá khứ có cùng mầm bệnh.
Điều gì quyết định phân tích PCR
Phản ứng chuỗi polymerase (PCR) dựa trên việc xác định các vùng DNA đặc trưng cho các mầm bệnh nhất định trong các mẫu vật liệu để nghiên cứu (biểu mô, máu). Phân tích giúp xác định các sinh vật nhỏ nhất gây bệnh (vi rút) bằng cách phát hiện RNA hoặc DNA của chúng trong vật liệu sinh học.
Quy trình xét nghiệm phát hiện kháng thể PCR Viêm gan C được thực hiện theo 3 giai đoạn:
- Chọn. Vật liệu sinh học được nghiên cứu được tinh chế khỏi các tạp chất và DNA thu được trong pha động của cột sắc ký.
- Khuếch đại. Việc phân tích được thực hiện trong bộ điều chỉnh nhiệt độ của thiết bị. Nó làm nóng và nguội các ống nghiệm với một chu kỳ nhất định. Đối với một nghiên cứu, có tới 35 chu kỳ được thực hiện. Kết quả là có đủ số lượng đoạn DNA để phát hiện, xác định và đánh giá mầm bệnh.
- Điện di. Các mảnh kết quả được đặt trong một gel có độ bão hòa khác nhau của agarose và điện di được thực hiện. Biểu đồ điện ảnh thu được sẽ được phân tích trên máy tính.
Không chỉ sử dụng nghiên cứu PCR tiêu chuẩn mà còn sử dụng phân tích PCR Thời gian thực. Đây là chẩn đoán thời gian thực. Phương pháp cho phép phân tích định tính và định lượng, giúp xác định sự hình thành và động lực của bệnh, cũng như kê đơn liệu pháp nhằm loại bỏ nguyên nhân nguồn gốc của bệnh lý. PCR thời gian thực cũng được sử dụng để xác định môi trường nuôi cấy thuần túy của các tác nhân lây nhiễm (định kiểu gen).
Thử nghiệm phản ứng chuỗi polymerase được thực hiện như thế nào
Để chẩn đoán, có thể sử dụng bất kỳ chất lỏng sinh học nào của con người. Vật liệu sinh học để xét nghiệm viêm gan C thường là máu.
Lấy mẫu để chẩn đoán được thực hiện theo thủ tụcvăn phòng. Để lấy máu, sử dụng các ống nghiệm dùng một lần có chất ức chế quá trình đông máu. Các hoạt động tập trung vào việc ngăn chặn sự lây lan của các tác nhân truyền nhiễm giúp tránh sự xâm nhập của một dòng vi sinh vật khác từ bên ngoài.
Máu xét nghiệm PCR viêm gan C được lấy vào buổi sáng lúc bụng đói. Mẫu được gửi ngay đến phòng thí nghiệm. Nó được phép bảo quản vật liệu sinh học ở nhiệt độ +4 đến +8 độ C. Các thùng chứa được dán nhãn và cung cấp hướng dẫn. Kết quả kiểm tra có sẵn trong vòng 48 giờ, đôi khi sớm hơn.
Các loại PCR
Phạm vi ứng dụng của phản ứng chuỗi polymerase khá rộng. Các nhà truyền nhiễm xác định bằng cách sử dụng PCR viêm gan B, các bệnh lây truyền qua côn trùng hút máu, AIDS, bệnh lao. Trong ung thư học, sử dụng phương pháp này, các tế bào khối u được phát hiện ở giai đoạn đầu.
Có khoảng mười bốn kiểu phân tích. Việc sử dụng loại này hay loại khác phụ thuộc vào phạm vi và kết quả cuối cùng của các phân tích. Một số loại PCR là không thể thiếu khi cần kết quả trong vòng 20 phút.
Để chẩn đoán viêm gan C, 3 loại phản ứng chuỗi polymerase được sử dụng:
- Đánh giá định tính có thể là dương tính, cho biết sự hiện diện của nhiễm trùng trong cơ thể hoặc âm tính, cho thấy không có virus flavivirus.
- Real-time PCR (phân tích định lượng) - xác định RNA định lượng của mầm bệnh tính bằng IU / ml.
- Genotyping là một phép phân tích cho biết loại (kiểu gen) của virus.
Để xác định và xác định chính xác bệnh, tiếp theo làcả ba loại nghiên cứu đều được sử dụng để kê đơn liệu pháp tối ưu.
Phân tích phản ứng chuỗi polymerase định tính
Một phân tích là bắt buộc đối với tất cả những ai có ELISA đã phát hiện ra kháng thể với HCV. PCR định tính cho bệnh viêm gan C là xét nghiệm tính nhạy cảm tiêu chuẩn. Phương pháp này chỉ nhằm mục đích phát hiện, không thực hiện đếm hoặc phân lập các chất khác.
Để phát hiện kháng thể, hệ thống xét nghiệm đặc biệt được sử dụng với ngưỡng nhạy cảm ít nhất 50 IU / ml. Nếu kháng thể được phát hiện, các xét nghiệm làm rõ khác được quy định. Nếu kết quả là âm tính, sẽ không tiến hành xét nghiệm nào nữa.
Trong một số trường hợp, kết quả âm tính giả có thể do nhân viên phòng thí nghiệm không đủ năng lực hoặc thuốc thử kém chất lượng. Đối với bảo hiểm, tốt hơn là nên thực hiện lại phân tích ở nơi khác.
PCR định lượng
Phương pháp được sử dụng để nghiên cứu trực tiếp số lượng flavivirus trong một chu kỳ phản ứng. Để đo chính xác, các đoạn DNA được sử dụng để lai hoặc các đoạn mồi được đánh dấu huỳnh quang được sử dụng. Có một tùy chọn phát hiện kinh tế bằng cách sử dụng thuốc nhuộm SYBL Green. Thuốc nhuộm được tạo thành một rãnh nhỏ trong DNA và chuyển sang màu xanh lam khi được chiếu tia laser.
Nồng độ được xác định bởi bộ khuếch đại thiết bị ở dạng tương đương kỹ thuật số. Các giá trị có thể khác nhau một chút giữa các phòng thí nghiệm và do đó phải được so sánh với các giá trị tham chiếu.
PCR định lượngviêm gan C giúp chọn liều lượng thuốc tối ưu và xác định thời gian điều trị. Tần suất của nghiên cứu phụ thuộc vào giai đoạn của bệnh, loại kiểu gen và quá trình điều trị theo quy định.
Xác định kiểu gen
Vi-rút viêm gan C có cấu tạo di truyền thay đổi. Nhiều sửa đổi khiến không thể tạo ra vắc-xin và cũng làm phức tạp hóa liệu pháp. Tổng số 11 kiểu gen và 100 kiểu phụ đã được xác định và ghi lại. Ở các nước thuộc Liên Xô cũ, ở những người bị nhiễm viêm gan C, PCR chủ yếu phát hiện kiểu gen 1b và 3.
Khi có bất kỳ kiểu gen nào, xơ gan hoặc ung thư gan có thể vui đùa. Đó là lý do tại sao việc phát hiện vi-rút kịp thời là rất quan trọng.
Đối với một số bệnh nhân, một số loại thuốc được thiết kế để chống lại HCV là độc hại. Việc xác định kiểu gen cho phép bạn xác định loại protein và kê đơn một loại thuốc hiệu quả.
Trong kết quả của các bài kiểm tra đánh máy, có một số với chữ cái Latinh viết thường cho biết kiểu gen của vi rút. Nếu HCV được phát hiện nhưng không được đánh máy, điều này có nghĩa là người đó có kiểu gen không điển hình cho một khu vực địa lý nhất định.
Kết quả phân tích
Bác sĩ giải mã kết quả. Chỉ dữ liệu từ một số nghiên cứu (cùng với tiền sử bệnh và kiểm tra) mới có thể cung cấp bức tranh thực tế tổng thể về bệnh sử.
- Ở người khỏe mạnh, thử phản ứng định tính trong vật liệu sinh học không phát hiện ra điều gì. Nếu giá trị "được phát hiện" được chỉ định, nhiễm trùng được xác nhận và bệnh nhâncần chẩn đoán thêm sau đó là điều trị.
- Xác định số lượng tác nhân lây nhiễm giúp đánh giá tải lượng virus trên cơ thể. Thông thường, PCR định lượng viêm gan C không phát hiện ra mầm bệnh. Chỉ số lên đến 810 ^ 5 được coi là tải trọng thấp và với liệu pháp thích hợp sẽ đảm bảo kết quả thuận lợi. Giá trị cao hơn đòi hỏi phải kiểm tra chuyên sâu và xác định liệu pháp lâu dài, để có kết quả tích cực mà không ai có thể đảm bảo.
- Kết quả xác định kiểu gen dương tính cho biết kiểu gen nào được công nhận. Kết quả âm tính cho thấy không có virus flavivirus hoặc sự hiện diện của kiểu gen không điển hình cho vùng này.
Xét nghiệm PCR dương tính cho biết điều gì
Bất kỳ bệnh nghiêm trọng nào cũng cần được chẩn đoán toàn diện. PCR viêm gan C dương tính xác nhận chẩn đoán, nhưng chỉ có thể đưa ra dự đoán sau khi có thêm các nghiên cứu trong phòng thí nghiệm và dụng cụ.
Việc phát hiện vi-rút không cung cấp bức tranh toàn cảnh về bệnh lý. Cần phải xác định loại và bản chất của nó, để xác định nó ảnh hưởng như thế nào đến gan và các cơ quan khác. Việc phát hiện sớm HCV thường có kết quả điều trị thuận lợi.
PCR âm tính với ELISA dương tính
Khi quan sát các triệu chứng đặc trưng của tổn thương gan, khả năng cao là nhiễm trùng đã xâm nhập vào cơ thể. Do đó, bạn nên liên hệ với bác sĩ gan mật hoặc chuyên gia về bệnh truyền nhiễm. Trong các cuộc phỏng vấn, chuyên gia sẽ thu thập tiền sử bệnh và kê đơn kiểm tra cần thiết.
Nếukết quả của các nghiên cứu về PCR viêm gan C là âm tính, và xét nghiệm miễn dịch enzym là dương tính, điều này cho thấy sự hiện diện của các kháng thể đối với flavivirus trong máu. Điều này thường xảy ra khi nhiễm trùng xâm nhập vào cơ thể với một lượng nhỏ, do đó hệ thống miễn dịch sẽ tự đối phó với nó. Nhưng những người như vậy vẫn được coi là nhiễm bệnh và bắt buộc phải khám bệnh 6 tháng một lần. Nếu với kết quả xét nghiệm như vậy, một người bị từ chối khám sức khỏe miễn phí, tốt hơn nên thực hiện PCR với một khoản phí để duy trì sức khỏe, và nếu kết quả dương tính, hãy liên hệ với bác sĩ chuyên khoa để được chẩn đoán và điều trị.
Ưu nhược điểm của phương pháp
Khi xác định chẩn đoán viêm gan C, PCR có một số ưu điểm:
- Phát hiện sớm mầm bệnh.
- Định nghĩa chính xác về virus.
- Hiệu quả của chẩn đoán.
- Tỷ lệ lỗi tối thiểu.
- Độ nhạy cao.
Nhược điểm của phương pháp:
- Chi phí phân tích cao. Xét nghiệm đòi hỏi thiết bị, thuốc thử đắt tiền và nhân viên y tế có trình độ chuyên môn cao. Tất cả cộng lại thành một số lượng đáng kể.
- Yêu cầu nghiêm ngặt đối với việc vận chuyển vật liệu sinh học.
Trị viêm gan
Phân tích PCR để tìm vi rút viêm gan C được coi là cơ bản để chẩn đoán, nhưng không phải là xác định. Để liệu pháp có hiệu quả, cần phải có một số nghiên cứu bổ sung trong phòng thí nghiệm và dụng cụ. Sau khi vượt qua tất cảcác biện pháp chẩn đoán bác sĩ kê đơn điều trị:
- Chế độ ăn uống số 5 được chỉ định.
- Rượu hoàn toàn bị loại trừ.
- Tiếp nhận chung Interferon và Ribavirin trong 25 ngày.
- Các khóa học về trình bảo vệ gan "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- Trong trường hợp đặc biệt, sử dụng plasmapheresis rời rạc.
Thuốc do bác sĩ gan mật kê đơn dùng đều đặn, không thay đổi liều lượng. Thời gian dùng thuốc được xác định bởi bác sĩ sau khi vượt qua các xét nghiệm kiểm soát. Sau khi hoàn thành liệu trình, bạn phải đến gặp bác sĩ sáu tháng một lần.
Chẩn đoán bằng PCR cho phép xác định tác nhân gây bệnh viêm gan C ở giai đoạn đầu. Điều này góp phần vào hiệu quả của liệu pháp và ngăn ngừa sự chuyển biến của bệnh thành các dạng nguy hiểm như xơ gan và ung thư biểu mô tế bào gan.
