Gần đây, một phương pháp đáng tin cậy, có độ nhạy cao và nhanh chóng để chẩn đoán các bệnh truyền nhiễm ở người khác nhau đã được phát triển. Phương pháp này được gọi là "phân tích PCR". Nó là gì, bản chất của nó là gì, những vi sinh vật nào có thể tiết lộ và cách uống thuốc đúng cách, chúng tôi sẽ nói trong bài viết của chúng tôi.
Lịch sử khám phá
Phát minh ra phương pháp phản ứng chuỗi polymerase (PCR) bởi nhà khoa học người Mỹ Kary Mullis vào năm 1983. Ban đầu, phương pháp chẩn đoán được cấp bằng sáng chế bởi Cetus Corporation, nơi người sáng tạo ra nó đã làm việc. Nhưng vào năm 1992, tất cả các quyền và bằng sáng chế đã được bán cho Hoffman-La Roche. Sau đó, hóa ra các nghiên cứu tương tự được thực hiện song song và được ghi lại bởi các nhà sinh vật học người Mỹ khác như Alice Chen, David Edgar, John Trell. Năm 1980, các nhà khoa học Liên Xô A. Slyusarenko, A. Kaledin và S. Gorodetsky cũng giải quyết vấn đề này. Do đó, không thể xác định chủ sở hữu bản quyền duy nhất. Nhiều nhà hóa sinh học lỗi lạc đã có đóng góp nhất định cho sự phát triển của kỹ thuật phản ứng chuỗi polymerase và đã được cấp bằng sáng chế cho những phát minh của họ. Hiện tại, phân tíchPCR được thực hiện ở khắp mọi nơi trong các phòng thí nghiệm được trang bị đặc biệt.
Bản chất của phương pháp chẩn đoán PCR
Phân tích PCR: nó là gì và nó hoạt động như thế nào? Thực chất của phương pháp là tăng thể tích của một môi trường vi sinh vật nhất định trong điều kiện nhân tạo bằng cách sử dụng enzym DNA polymerase đặc biệt. Đối với điều này, vật liệu DNA hiện có được nhân lên nhiều lần. Do đó, khi có vi sinh vật gây bệnh trong mẫu, số lượng của nó sẽ tăng lên do các thao tác trong phòng thí nghiệm sinh hóa, và sẽ không khó để phát hiện vi khuẩn dưới kính hiển vi.
Nghiên cứu tài liệu được thực hiện như thế nào?
Cần thiết để phân tích:
- ma trận DNA;
- sơn lót nối các đầu của vật liệu;
- enzyme DNA polymerase chịu nhiệt;
- hóa chất giúp các enzym hoạt động bình thường;
- dung dịch đệm cần thiết để tạo điều kiện thích hợp cho sự sinh trưởng và phát triển của vật liệu DNA.
Để thực hiện PCR, 25-30 lần lặp lại được thực hiện, bao gồm ba giai đoạn: biến tính, ủ và kéo dài.
Để phân tích phản ứng chuỗi polyme, một thiết bị đặc biệt được sử dụng - một bộ khuếch đại. Trang thiết bị hiện đại cho phép bạn thiết lập chương trình cần thiết cho ống sưởi và làm mát để loại bỏ lỗi trong quá trình chẩn đoán.
Chẩn đoán được sử dụng ở đâu?
Phương pháp phản ứng chuỗi polyme được sử dụng trong các lĩnh vực y học khác nhau:
- tội phạm vớinó xác định vật chất di truyền như tóc, nước bọt hoặc máu;
- Xét nghiệm máu PCR giúp xác định kiểu gen, chẳng hạn, để phát hiện phản ứng vốn có về mặt di truyền của cá nhân với một loại thuốc nhất định;
- sử dụng phương pháp này để thiết lập mối quan hệ gia đình giữa mọi người;
- Phương pháp PCR phổ biến nhất đã trở thành phương pháp chẩn đoán y tế để xác định các bệnh truyền nhiễm khác nhau.
PCR phát hiện những bệnh nhiễm trùng nào?
Vì vậy, y học đã sử dụng phân tích PCR từ lâu và thành công. Nó là gì, chúng ta đã biết. Và những mầm bệnh nào có thể được phát hiện với nó? Các bệnh truyền nhiễm sau đây được chẩn đoán bằng phương pháp PCR:
- viêm gan A, B, C;
- bệnh tăng ureaplasmosis;
- nấm candida;
- chlamydia;
- mycoplasmosis;
- bệnh lang ben;
- tăng bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng;
- trichomonas;
- nhiễm virut gây u nhú;
- lao;
- nhiễm trùng herpes loại 1 và 2;
- vi khuẩn helicobacteriosis;
- cytomegalovirus;
- bạch hầu;
- nhiễm khuẩn salmonellosis;
- nhiễm HIV.
Ngoài ra, phương pháp PCR được sử dụng trong chẩn đoán ung thư.
Lợi ích của phương pháp
Chẩn đoán PCR có một số ưu điểm:
- Độ nhạy cao. Ngay cả khi chỉ có một vài phân tử DNA vi sinh vật, phân tích PCR xác định sự hiện diện của nhiễm trùng. Phương pháp này sẽ giúp chữa khỏi các bệnh mãn tính và tiềm ẩn. Thông thường trong những trường hợp như vậy, vi sinh vậtnếu không thì không thể thay đổi được.
- Bất kỳ vật liệu nào cũng thích hợp để nghiên cứu, chẳng hạn như nước bọt, máu, chất tiết sinh dục, tóc, tế bào biểu mô. Phổ biến nhất là phân tích máu và phết tế bào niệu sinh dục để làm PCR.
- Không cần cây trồng dài ngày. Quá trình chẩn đoán tự động cho phép bạn nhận được kết quả nghiên cứu sau 4-5 giờ.
- Phương pháp gần như đáng tin cậy 100%. Chỉ những trường hợp cá biệt có kết quả âm tính giả mới được ghi nhận.
- Khả năng xác định một số loại mầm bệnh từ một mẫu vật liệu duy nhất. Điều này không chỉ đẩy nhanh quá trình chẩn đoán bệnh mà còn giảm đáng kể chi phí vật tư. Thường thì bác sĩ chỉ định một phân tích PCR toàn diện. Giá của cuộc kiểm tra, bao gồm việc xác định sáu tác nhân gây bệnh, là khoảng 1.500 rúp.
Khuyến nghị để chuẩn bị cho phân tích
Để kết quả đáng tin cậy trong quá trình nghiên cứu PCR, bạn cần thực hiện xét nghiệm, theo các khuyến nghị để chuẩn bị sơ bộ cho chẩn đoán:
- Trước khi hiến tặng nước bọt, bạn nên hạn chế ăn uống và uống thuốc 4 giờ trước khi lấy mẫu. Ngay trước khi làm thủ thuật, hãy súc miệng bằng nước đun sôi.
- Các quy tắc trên cũng cần được tuân thủ khi lấy mẫu từ bề mặt bên trong của má. Sau khi rửa sạch, nên massage da nhẹ nhàng để làm nổi bật tuyến bài tiết.
- Nước tiểu thường được thu thập tại nhà. Để làm được điều này, bạn cần tiến hành thông tắc bồn cầu kỹ lưỡngbộ phận sinh dục. Lấy 50-60 ml nước tiểu trong hộp nhựa vô trùng. Để đảm bảo độ tinh khiết của chất liệu, phụ nữ nên đưa tampon vào âm đạo, và đối với nam giới nên kéo nếp gấp da lại càng nhiều càng tốt. Đừng quyên góp trong thời gian của bạn.
- Để hiến tặng tinh trùng, bạn phải hạn chế quan hệ tình dục trong 3 ngày trước khi lấy mẫu. Các bác sĩ cũng khuyên không nên đến phòng tắm hơi và tắm nước nóng, uống rượu và đồ ăn cay. Bạn phải nhịn đi tiểu 3 giờ trước khi kiểm tra.
- Để làm xét nghiệm phết tế bào niệu sinh dục, ví dụ, nếu xét nghiệm PCR được thực hiện để tìm chlamydia, cả phụ nữ và nam giới nên nghỉ ngơi quan hệ tình dục trong 3 ngày. Thuốc kháng khuẩn không nên dùng 2 tuần trước khi phân tích. Trong một tuần, bạn cần ngừng sử dụng gel bôi trơn, thuốc mỡ, thuốc đặt âm đạo, thụt rửa. Trước khi khám 3 giờ, bạn phải nhịn tiểu. Trong thời gian hành kinh không được lấy mẫu xét nghiệm, chỉ 3 ngày sau khi hết máu, bạn có thể lấy dịch tiết niệu sinh dục.
PCR khi mang thai
Trong thời kỳ mong chờ em bé, nhiều bệnh lây nhiễm qua đường tình dục vô cùng nguy hiểm cho sự phát triển bình thường của thai nhi. STDs có thể gây chậm phát triển trong tử cung, sẩy thai hoặc sinh non, dị tật bẩm sinh của trẻ. Do đó, việc kiểm tra PCR trong giai đoạn đầu thai kỳ là cực kỳ quan trọng. Cần phải vượt qua phân tích khi đăng ký - tối đa 12 tuần.
Chất liệu được lấy từ ống cổ tử cung bằng bàn chải đặc biệt. Thủ thuật không đau và không gây nguy hiểm cho em bé. Thông thường trong thời kỳ mang thai, người ta tiến hành phân tích chlamydia bằng phương pháp PCR, cũng như bệnh nhiễm trùng ureaplasmosis, bệnh mycoplasmosis, cytomegalovirus, herpes, papillomavirus. Một tổ hợp kiểm tra như vậy được gọi là PCR-6.
PCR chẩn đoán HIV
Vì thực tế là phương pháp phản ứng chuỗi polymerase rất nhạy cảm với những thay đổi của cơ thể và điều kiện chẩn đoán, nhiều yếu tố có thể ảnh hưởng đến kết quả. Vì vậy, phân tích PCR để tìm nhiễm HIV không phải là một phương pháp đáng tin cậy, hiệu quả của nó là 96–98%. Trong 2-4% trường hợp còn lại, xét nghiệm cho kết quả dương tính giả.
Nhưng trong một số trường hợp, chẩn đoán PCR HIV là không thể thiếu. Nó thường được cấp cho những người có kết quả ELISA âm tính giả. Các chỉ số như vậy cho thấy một người chưa phát triển các kháng thể chống lại vi rút và chúng không thể bị phát hiện nếu không có sự gia tăng nhiều lần về số lượng. Đây chính xác là những gì có thể đạt được bằng cách tiến hành xét nghiệm máu PCR.
Những chẩn đoán này cũng cần thiết cho trẻ em trong năm đầu đời được sinh ra từ người mẹ nhiễm HIV. Phương pháp này là cách duy nhất để xác định tình trạng của trẻ một cách đáng tin cậy.
PCR để chẩn đoán viêm gan
Phương pháp phản ứng chuỗi polymerase cho phép phát hiện DNA của virus viêm gan A, B, C từ rất lâu trước khi hình thành kháng thể chống lại sự lây nhiễm hoặc khi bắt đầu xuất hiện các triệu chứng của bệnh. Phân tích PCR đối với bệnh viêm gan C đặc biệt hiệu quả, vì trong 85% trường hợp bệnh này không có triệu chứng và không cóđiều trị kịp thời chuyển sang giai đoạn mãn tính.
Phát hiện kịp thời mầm bệnh sẽ giúp tránh biến chứng và điều trị lâu dài.
Kiểm tra PCR toàn diện
Phân tích PCR phức tạp: nó là gì? Đây là một cuộc kiểm tra sử dụng phương pháp phản ứng chuỗi cao phân tử, bao gồm xác định một số loại nhiễm trùng đồng thời: mycoplasmaroductionium, mycoplasma hominis, gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, cytomegalovirus, ureaplasma urealiticum, herpes loại 1 và 2, bệnh lậu, papillomavirus. Giá của chẩn đoán như vậy dao động từ 2000 đến 3500 rúp. tùy thuộc vào phòng khám, vật liệu và thiết bị được sử dụng, cũng như loại phân tích: định tính hay định lượng. Điều gì là cần thiết trong trường hợp của bạn - bác sĩ sẽ quyết định. Trong một số trường hợp, chỉ cần xác định sự hiện diện của mầm bệnh là đủ, ví dụ như ở những trường hợp khác, với nhiễm HIV, thì hiệu giá định lượng đóng một vai trò quan trọng. Khi chẩn đoán tất cả các mầm bệnh ở trên, cuộc kiểm tra được gọi là "phân tích PCR-12".
Bảng điểm kết quả phân tích
Giải mã phân tích PCR không khó. Chỉ có 2 thang đo của chỉ số - "kết quả dương tính" và "kết quả âm tính". Khi phát hiện mầm bệnh, các bác sĩ có thể khẳng định chắc chắn 99% sự hiện diện của bệnh và bắt đầu điều trị cho bệnh nhân. Với phương pháp định lượng để xác định nhiễm trùng, cột tương ứng sẽ ghi chỉ số số lượng vi khuẩn được phát hiện. Chỉ có bác sĩ mới có thể xác định mức độ của bệnh và kê đơn phương pháp điều trị cần thiết.
Trong một số trường hợp, ví dụ, khi xác định nhiễm HIV bằng PCR, với kết quả âm tính, cần phải tiến hành thêm các xét nghiệm để xác nhận các chỉ số thu được.
Thi ở đâu?
Làm xét nghiệm PCR ở đâu: tại phòng khám công hay phòng xét nghiệm tư nhân? Thật không may, ở các cơ sở y tế thành phố, thiết bị và phương pháp thường lạc hậu. Vì vậy, tốt hơn hết là nên ưu tiên các phòng xét nghiệm tư nhân có trang thiết bị hiện đại và nhân viên có trình độ chuyên môn cao. Ngoài ra, ở phòng khám tư nhân, bạn sẽ nhận được kết quả nhanh hơn rất nhiều.
Ở Moscow, nhiều phòng thí nghiệm tư nhân cung cấp phân tích PCR cho các bệnh nhiễm trùng khác nhau. Ví dụ, tại các phòng khám như Vita, Phòng khám phức hợp, Gia đình hạnh phúc, Uro-Pro, phân tích PCR được thực hiện. Giá khám là từ 200 rúp. để xác định một mầm bệnh.
Có thể kết luận rằng chẩn đoán các bệnh truyền nhiễm bằng PCR trong hầu hết các trường hợp là một cách nhanh chóng và đáng tin cậy để phát hiện mầm bệnh trong cơ thể trong giai đoạn đầu của nhiễm trùng. Tuy nhiên, trong một số trường hợp nhất định, bạn nên chọn các phương pháp chẩn đoán khác. Chỉ có một chuyên gia mới có thể xác định sự cần thiết của một nghiên cứu như vậy. Giải mã phân tích PCR cũng đòi hỏi một cách tiếp cận chuyên nghiệp. Làm theo lời khuyên của bác sĩ và không làm các xét nghiệm không cần thiết.
