Theo thống kê của WHO, trong 40 năm qua, 25 triệu người đã chết vì AIDS. Thiệt hại do nhiễm trùng này là rất lớn. Hầu hết những người bị nhiễm hóa ra là ở Châu Phi, nơi mà căn bệnh lây nhiễm này xuất phát. Với HIV, việc chẩn đoán bệnh trở nên đặc biệt thích hợp. Đúng là chưa có phương pháp điều trị khỏi HIV, nhưng điều trị sớm có thể kéo dài thời gian sống và cải thiện chất lượng của bệnh nhân.
Chẩn đoán nhiễm HIV
Nhiễm HIV được xác định ở các giai đoạn khác nhau bằng các phương pháp sau:
- ELISA - xét nghiệm miễn dịch enzym.
- Western blot.
- PCR - phản ứng chuỗi polymerase.
- Kiểm tra nhanh.
Phương pháp PCR được phát triển bởi nhà hóa sinh người Mỹ Kary Mullis, người đã nhận giải Nobel về nó vào năm 1983. Ngày nay, phương pháp này trong y học trong chẩn đoán tất cả các bệnh nhiễm trùng được coi là phương pháp hàng đầu do tính chính xác và hàm lượng thông tin của nó. HIV cũng không ngoại lệ trong vấn đề này.
Bản chất của phân tích
Bất kỳ tế bào sống nào cũng chứa RNA và DNA. Các axit nucleic này có khả năng tự sao chép và tự sao chép. Đối với mỗi lần lây nhiễm, các đoạn DNA là duy nhất. TẠItrong chất lỏng sinh học, những đoạn axit nucleic này luân chuyển. Chúng được bắt và nhận dạng bằng thiết bị đặc biệt - lò phản ứng. Đây là cơ sở của phương pháp. Trợ lý phòng thí nghiệm đếm những mảnh vỡ này. HIV retrovirus được theo dõi để tìm RNA. Ngay cả với các bản sao đơn lẻ của các hạt virus, PCR có thể phát hiện và đếm chúng.
Máu tĩnh mạch thường được sử dụng làm chất lỏng xét nghiệm nhất. Các thành phần đặc biệt của phương pháp liên kết với các phần tử vi rút và làm cho chúng có thể phát hiện được, vì các phần được tìm thấy được nhân lên.
Trong trường hợp nhiễm HIV, kết quả về sự hiện diện của vi rút có thể được lấy từ rất lâu trước khi phòng khám xuất hiện. Do đó, do độ nhạy cao nên PCR có giá trị chẩn đoán cao như vậy. Một điểm cộng lớn của PCR là tính linh hoạt của phương pháp. Thời gian ủ bệnh của nhiễm trùng đối với PCR không phải là một trở ngại.
Chi phí nghiên cứu
Phương phápPCR khá tốn kém. Đây là một trong những nhược điểm lớn của nó. Nó yêu cầu thiết bị mới nhất và trợ lý phòng thí nghiệm có trình độ cao. Theo quan điểm của những điều đã nói ở trên, chẩn đoán PCR không được thực hiện ở các khu định cư nhỏ. Bạn chỉ có thể đi xét nghiệm tại các phòng khám chuyên khoa lớn.
Chi phí xét nghiệm HIV DNA tại các phòng khám ở Moscow bắt đầu từ 2.800 rúp, tải lượng vi rút (RNA vi rút trong huyết tương) được xác định bằng PCR - từ 8.800 rúp và HIV kháng thuốc ức chế protease - từ 16.500 rúp. Như bạn thấy, giá cả khá cao. PCR có thể được thực hiện miễn phí tại các phòng khám công theo chính sách MHI. Quan trọng,rằng thủ tục có thể được thực hiện ẩn danh. Trong sổ đăng ký, bệnh nhân nhận được một số mà anh ta có thể tìm ra kết quả. Trong các trung tâm y tế hiện đại, có các tài khoản cá nhân của khách hàng, nơi những dữ liệu này sẽ được nhập vào.
Mục tiêu nghiên cứu
PCR chẩn đoán HIV được chỉ định trong những trường hợp như vậy:
- Phát hiện nhiễm trùng ở trẻ sinh ra từ người mẹ hoặc người mang mầm bệnh để xác định nhiễm trùng trong tử cung.
- Nếu ELISA đưa ra kết quả đáng ngờ (PCR đối với HIV giúp đưa ra chẩn đoán cuối cùng trong trường hợp này).
- Để phát hiện hàm lượng vi rút trong cơ thể.
- Với một tế bào miễn dịch dương tính, chúng bổ sung cho nhau bằng PCR.
- Thử nghiệm các nhà tài trợ.
- Để chẩn đoán sớm HIV.
- Để xác định hiệu quả và khả năng chống lại ART.
Ưu điểm của phân tích này là PCR tìm HIV có thể được thực hiện ngay cả đối với trẻ em dưới một tuổi.
Nghiên cứu thường được thực hiện không phải để chẩn đoán chính mà đã được thực hiện trong quá trình điều trị. Chẩn đoán chính là nghiên cứu huyết thanh học (chúng xác định mức độ kháng thể với HIV). Nếu kết quả dương tính giả lặp lại, điều này có thể do tải lượng vi-rút thấp.
PCR chẩn đoán HIV khi chưa có kháng thể. Phương pháp ELISA trong trường hợp này sẽ không đưa ra câu trả lời.
Và PCR cho HIV sẽ dương tính. Nhưng các triệu chứng của giai đoạn này của HIV không đặc hiệu. Bệnh nhân lần đầu tiên được điều trị ARVI bởi một bác sĩ đa khoa trong một thời gian dài và không thành công. Cần lưu ý rằng việc chẩn đoán HIV chỉ dựa trênPCR không được đặt, nó là cần thiết để vượt qua các xét nghiệm toàn diện khác. Phương pháp PCR thường là phương pháp bổ trợ cho các trường hợp khó.
Chuẩn bị phân tích
Trước khi làm PCR phát hiện HIV, trước khi xét nghiệm 2 ngày không nên ăn đồ béo, rượu bia. Tốt hơn là không nên căng thẳng về tinh thần và thể chất. Nếu bệnh nhân được chỉ định một liệu trình kích thích miễn dịch, nó sẽ được dừng lại 2 tuần trước khi phân tích.
Máu tốt nhất nên lấy vào buổi sáng. Cũng có thể kiểm tra các chất dịch sinh học khác của cơ thể (tinh trùng, dịch tiết âm đạo), nhưng máu là chất liệu tốt nhất. Nước bọt, mồ hôi, nước tiểu và nước mắt không được sử dụng, vì hàm lượng vi rút trong đó là tối thiểu.
Điểm cộng của PCR cho HIV
Ưu điểm của phương pháp là xác suất kết quả dương tính giả cực kỳ thấp, tính phổ biến của phản ứng đối với bất kỳ chất lỏng sinh học nào của cơ thể. Phân tích có phạm vi rộng:
- Một lần lấy máu có thể được sử dụng để phát hiện các bệnh nhiễm trùng khác nhau.
- Kỹ thuật khẩn trương, có kết quả ngay ngày hôm sau.
- Độ tin cậy từ 85 đến 98%.
- Sự hiện diện của HIV có thể được xác định sau 10-14 ngày kể từ khi nhiễm bệnh (chưa có kháng thể tại thời điểm này).
- Không giới hạn độ tuổi, có thể thực hiện ngay từ khi mới sinh.
Nhược điểm của phương pháp
Nhược điểm của PCR như sau:
- Chi phí phân tích.
- Yêu cầu thiết bị y tế tinh vi.
- Yêu cầu bác sĩ và trợ lý phòng thí nghiệm có trình độ cao,phân tích người chọn.
- Phản ứng rất nhạy nên sai số có thể là 20%.
- Có thể dẫn đến kết quả dương tính giả nếu bệnh nhân có quá trình tự miễn dịch, ung thư, nhiễm trùng mãn tính.
- Đặc biệt cần vệ sinh sạch sẽ khuôn viên phòng thí nghiệm, vì vi rút có thể xâm nhập vào phân tích từ không khí. Khi đó kết quả sẽ sai.
Đối với các phòng thí nghiệm tiến hành PCR, để nâng cao chất lượng chẩn đoán, các biện pháp đặc biệt nghiêm ngặt đã được phát triển theo hệ thống SanPiN để kiểm soát nội bộ. Ngoài ra, tất cả các quy tắc làm việc với kỹ thuật này phải được tuân thủ:
- Yêu cầu tuân thủ nghiêm ngặt thông tin trên ống nghiệm.
- Trước khi lấy mẫu máu, hãy xem xét lại và đảm bảo rằng quá trình phân tích đã được lên lịch.
- Y tá phải dán nhãn các ống một cách chính xác.
- Trợ lý phòng thí nghiệm phải thực hiện chính xác tất cả các thao tác với vật liệu sinh học để ngăn ngừa lây nhiễm chéo.
- Hệ thống kiểm tra phải có chất lượng tuyệt vời.
Chỉ khi đáp ứng tất cả các điều kiện này, sai số trong câu trả lời chỉ có thể là khoảng 2% số tập.
Thời lượng phân tích
Nhiều người quan tâm đến việc PCR tìm HIV sẽ sẵn sàng trong bao lâu. Chẩn đoán kéo dài không quá 8 giờ. Bệnh nhân có thể nhận được câu trả lời vào ngày hôm sau. Thử nghiệm cấp tốc được thực hiện trong vòng 2 giờ.
PCR Độ tin cậy
Mặc dù có nhiều ưu điểm, nhưng PCR không được coi là phương pháp chẩn đoán lý tưởng. Anh ấy được liên lạc trong trường hợpsự cần thiết phải thực hiện các xét nghiệm sàng lọc sự hiện diện của HIV trong cơ thể.
Khi nào thì lấy máu để phân tích?
Làm PCR cho HIV trong bao lâu? Kết quả đáng tin cậy có thể đạt được khi lấy máu 4-4 ngày sau khi bị nhiễm trùng. Sau 2 tuần, độ tin cậy đối với HIV sẽ là 98% và trong khoảng thời gian 5 ngày - 80%. Sự hiện diện của kết quả âm tính trong PCR đối với HIV sẽ đáng tin cậy, nhưng để có kết quả chính xác tuyệt đối, ELISA cũng được thực hiện.
Phân tíchELISA sẽ chỉ có hiệu quả nếu có kháng thể chống lại virus, thời gian này có thể mất từ 1-3 tháng đến sáu tháng. Vì ELISA cho xác suất cao hơn (98% -99,9%), PCR không thể được gọi là xét nghiệm khẳng định 100% về sự hiện diện của nhiễm HIV. Nhưng mặt khác, đây là kỹ thuật duy nhất mà bạn không cần đợi sự xuất hiện của kháng thể.
Với HIV, PCR có thể cung cấp thông tin về hiệu quả của điều trị ARV, giai đoạn của bệnh HIV và số lượng VNs (một đánh giá định lượng về sự hiện diện của HIV trong cơ thể). Điều này sẽ nói lên mức độ nghiêm trọng và mức độ của sự thay đổi.
Xét nghiệm PCR để tìm HIV cũng cần thiết nếu có kháng thể trong máu, nhưng sự hiện diện của chúng không cho thấy mức độ tin cậy của việc lây nhiễm HIV trên lâm sàng.
Họ không chỉ được kiểm tra để tìm nhiễm trùng và quan hệ tình dục thông thường. Các dịp khác:
- Lập kế hoạch mang thai.
- Hoạt động sắp tới.
- Tình dục thông thường.
- Một số ngành nghề yêu cầu bài kiểm tra này để được nhận vào làm việc (giáo viên, bác sĩ và nhân viên y tế khác).
- Tù nhân.
- bệnh nhân lao.
- Nhân viên của Bộ Tình trạng Khẩn cấp và cảnh sát.
- Trở về sau kỳ nghỉ từ đất nước xa lạ (nếu bạn muốn đảm bảo rằng không bị nhiễm trùng).
- Gái mại dâm.
- Sinh viên nước ngoài.
- Thuốc.
Ngoài ra, một số triệu chứng nhất định ở bệnh nhân có thể buộc phải xét nghiệm HIV:
- Giảm cân đột ngột.
- Tiêu chảy kéo dài hơn 3 tuần
- Nhiệt độ cao bất hợp lý trong thời gian dài.
- Sưng hạch bạch huyết.
- Không rõ nguyên nhân do viêm phổi, nhiễm nấm Candida …
Giải mã phân tích là đặc quyền của bác sĩ chăm sóc, không phải trợ lý phòng thí nghiệm.
PCR hay ELISA, cái nào tốt hơn?
Khi PCR chẩn đoán RNA của vi rút HIV được phát hiện cả định tính và định lượng. Phân tích này xác định rõ ràng một tác nhân gây bệnh cụ thể ngay cả khi có một số tác nhân gây bệnh phản ứng chéo. Vật liệu sinh học có thể được sử dụng ngay cả ở dạng khô. Nhược điểm là độ nhạy cao của PCR, khi kết quả dương tính giả có thể được đưa ra bởi sự hiện diện của thậm chí một lượng nhỏ DNA ngoại lai trên dụng cụ hoặc ống nghiệm.
Nhiệm vụ và khả năng của ELISA là xác định sự hiện diện của các kháng thể đối với virus retrovirus. Mặc dù độ chính xác của nó là 99%, nhưng nó không thể áp dụng trong giai đoạn đầu.
Xét nghiệm định tính HIV
PCR chất lượng cao xác định sự hiện diện của virus trong cơ thể. Kết quả trong trường hợp này sẽ như thế này: dương tính, dương tính giả, âm tính. Nhưng nghiên cứu này sẽ không cung cấp thông tin về số lượng retrovirus. Như một phân tích định tínhkhông phù hợp khi nhiễm HIV đã được phát hiện trong cơ thể bằng các phương tiện khác.
Không thể kiểm soát hiệu quả điều trị bằng PCR chất lượng cao.
Định lượng HIV
Chỉ được thực hiện bởi những người nhiễm HIV để đếm số lượng bản sao của RNA vi rút trong một sản phẩm sinh học.
Mục đích của nghiên cứu như vậy là để theo dõi quá trình điều trị đang diễn ra và xác định khả năng kháng thuốc của vi rút. Liệu pháp kháng vi-rút trong những tính toán như vậy không được bác sĩ chỉ định một cách mù quáng, vì vậy nó sẽ hiệu quả hơn. PCR định lượng cho nhiễm HIV được thực hiện thường xuyên hơn nhiều. Phân tích này được hiển thị dưới dạng bản sao / ml máu.
Kết quả nào có thể đưa ra:
- RNA của virus không có hoặc rất nhỏ (khoảng 20 bản sao / ml). Không có chẩn đoán chắc chắn.
- Từ 20 - 10 đến bản sao độ 6 / ml - chẩn đoán đáng tin cậy.
- Hơn 106 bản / ml - VN cao.
Phòng thí nghiệm có thể thực hiện xét nghiệm PCR theo thời gian thực để tìm HIV. Điều này ngụ ý việc quan sát và đánh giá số lượng tích lũy các sản phẩm PCR với việc ghi lại kết quả tự động.
